一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為分析方法，檢測(cè)食品中赭曲霉毒素的殘留。該方法可簡(jiǎn)化樣品的前處理過(guò)程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用， 操作簡(jiǎn)便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

赭曲霉毒素(CAS:303-47-9)。

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于糧油中赭曲霉毒素 A 殘留的 HPLC 檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

GB5009.96—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中赭曲霉毒素 A 的測(cè)定》。

五、實(shí)驗(yàn)材料

廣州菲羅門(mén)(FLM) Polyclean X-MAX 150 mg/6 mL(貨號(hào)：9B-P003-06150)。

六、實(shí)驗(yàn)方法

1、樣品提取

珍珠米

準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎好珍珠米 5.0 g 置于 50 mL 離心管中，加入 25 mL 提取液（0.1mol/L 氫氧化鉀溶液：甲醇：水=2:60:38），于振蕩器振蕩提取 20 min，4000 r/min 離心 5 min，取上層液 5 mL 備用。

 

醬油

準(zhǔn)確稱(chēng)取醬油 5.0 g 置于 50 mL 離心管中，加入 20 mL 提取液（同 1.1），于振蕩器中提取 20 min，4000 r/min 離心 5 min，取 5 mL 提取液備用。

 

2、SPE 柱凈化

(1)活化：Polyclean X-MAX 小柱使用前用 5 mL 甲醇活化，3 mL 水，3 mL 提取液（同 1.1）平衡。

(2)上樣和洗脫：取 5 mL 備用液過(guò)柱，棄去流出液；分別加 3 mL 淋洗液(0.1mol/L 氫氧化鉀溶液：乙腈：水=3:50:47)，3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗小柱，棄去流出液， 抽干小柱；用 5 mL 洗脫液(甲醇：乙腈：甲酸：水=40:50:7.5:2.5)洗脫，收集洗脫液（整個(gè)上樣、洗脫過(guò)程控制流速在 1 mL/min 內(nèi)）。

(3)上機(jī)測(cè)試：洗脫液于 50 °C 下用氮?dú)獯蹈桑?1 mL 初始流動(dòng)相（2 %乙酸水： 乙腈=50.5:49.5）定容，經(jīng) 0.22 μm 濾膜過(guò)濾，供上機(jī)測(cè)試。

 

3、HPLC 條件
設(shè)備：Waters Alliance 2695

色譜柱：SuperLu C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)，也可用其它規(guī)格 C18 柱檢測(cè)器：Waters 2475 熒光檢測(cè)器

檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng) 333 nm 發(fā)射波長(zhǎng) 477 nm 等度洗脫： A：2 %乙酸水 B：乙腈=50.5：49.5 洗脫方式：等度洗脫, A : B=50.5 : 49.5

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣體積：20 μL

1、4.0 μg/kg 食品基質(zhì)中赭曲霉毒素的添加回收結(jié)果 表 1 4.0 μg/kg 食品基質(zhì)中赭曲霉毒素的添加回收結(jié)果

2、 添加水平為 4.0 μg/kg 赭曲霉毒素檢測(cè)的液相色譜圖

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖 1 添加水平為 4.0 μg/kg 赭曲霉毒素檢測(cè)的液相色譜圖